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植物 β-淀粉酶(β-Amylase,β-AL)試劑盒 說明 技術(shù)文章

更新時(shí)間:2019-06-12  |  點(diǎn)擊率:2200

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植物 Β-淀粉酶(Β-Amylase,Β-AL)試劑盒

商品貨號(hào):QS3402
英文名稱:β-amylase Assay Kit
別名:植物β-淀粉酶(β-AL)活性檢測試劑盒
檢測方法:常量法

 

商品貨號(hào):商品品牌:規(guī)格基本售價(jià)選擇規(guī)格
QS3402-50管/24樣索橋生物50管/24樣¥460.00元 

 

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

 

測定意義:

淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。

測定原理:

還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐熱。根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,就可測出另一種淀粉酶的活力。

 

產(chǎn)品說明書

貨號(hào):QS3402                規(guī)格:50 管/24 樣

 

  植物 β -淀粉酶(β -amylase,β -AL)試劑盒說明書

        可見分光光度法

 

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,主要包括 α -淀粉酶和 β -淀粉酶。β -淀粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機(jī) 地作用于淀粉中的 α -1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。

測定原理:

還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。α -淀粉酶不耐酸,β -淀粉酶不耐熱。 根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,就可測出另一種淀粉酶的活力。

自備實(shí)驗(yàn)用品和儀器:

可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一:50mL×1 瓶,常溫保存,若有黃色晶體析出,需 90℃加熱溶解后再用;

試劑二:40mL×1 瓶,4℃保存,若有沉淀析出,需 70℃加熱后再用。

粗酶液提?。?/strong>

組織:稱取 0.1~0.2g 樣本(建議稱取約 0.1g 樣本),加入 1mL 蒸餾水,研磨勻漿;將勻 漿倒入離心管中,提取液在室溫下放置提取 15min,每 5min 振蕩 1 次,使其充分提??;3000g, 25℃離心 10min,取上清液加蒸餾水定容至 10 mL,搖勻,即淀粉酶原液。

吸取上述淀粉酶原液 1mL,加入 4mL 蒸餾水,搖勻,即為淀粉酶稀釋液,用于(α +β ) 淀粉酶總活力的測定。

血清(漿)等液體樣本:(1)直接檢測 α -淀粉酶。(2)吸取淀粉酶原液 1mL,加入 4mL 蒸餾水,搖勻,即為淀粉酶稀釋液,用于(α +β )淀粉酶總活力的測定。

測定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長到 540 nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 試劑一和試劑二 40℃預(yù)熱 10min。

3、測定操作表:

試劑名稱(μ L)α -淀粉酶活力測定總淀粉酶活力測定
對照管測定管對照管測定管
淀粉酶原液250250  
70℃水浴 15min 左右,冷卻
淀粉酶稀釋液  250250
蒸餾水250 250 
試劑二 250 250
在 40℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫 5min
試劑一500500500500

混勻,95℃水浴 5min,冷卻,在 540nm 下測定吸光度,從左到右分別記為 A1、A2、A3 和 A4。

酶活性計(jì)算:

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸曲線為 y=3.7215x -0.1778; x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y 為吸光值。

2、α -淀粉酶活性

(1)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

單位定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活力單位。

α -淀粉酶活性(mg/min/g鮮重)=[(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T =1.075×(A2-A1+0.1778)÷W

(2)按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T =0.1075×(A2-A1+0.1778) ÷Cpr

(3)血清(漿)等液體樣本中 α -淀粉酶活性計(jì)算

單位定義:每 mL 血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位。

α -淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷V 樣÷T=0.1075×(A2-A1 +0.1778)

3、總淀粉酶活性計(jì)算

(1)按照樣品質(zhì)量計(jì)算

單位定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活力單位。

總淀粉酶活性(mg/min//g 鮮重)=5×[(A4-A3+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣 總)÷T=5.375×(A4-A3+0.1778)÷W

(2)按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活力單位。

總淀粉酶活性(mg/min/mg prot)=5×[(A4-A3+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T =0.5375×(A4-A3+0.1778) ÷Cpr

(3)血清(漿)等液體樣本中總淀粉酶活性計(jì)算

單位定義:每 mL 血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位。

總淀粉酶活性(mg/min/mL) =5×[(A4-A3+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷V 樣÷T =0.5375×(A4-A3+0.1778)

4、β -淀粉酶活性計(jì)算

(1)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

單位定義:每 g 組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活力單位。

β - 淀粉酶活性 (mg/min/g 鮮 重 )= 淀 粉 酶 總 活 性 -α - 淀粉酶活性 =[5.375×(A4-A3 + 0.1778)-1.075×(A2-A1+0.1778)]÷W

(2)按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活力單位。

β -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)=淀粉酶總活性-α -淀粉酶活性=[0.5375×(A4-A3+ 0.1778)-0.1075×(A2-A1+0.1778)]÷Cpr

(3)血清(漿)等液體樣本中 β -淀粉酶活性計(jì)算

單位定義:每 mL 血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位。

β - 淀 粉 酶 活 性 ( mg/min/mL ) = 淀 粉 酶 總 活 性 -α - 淀 粉 酶 活 性 =0.5375×(A4-A3 + 0.1778)-0.1075×(A2-A1+0.1778)

5:總淀粉酶稀釋倍數(shù);V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.5mL;V 樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.25 mL;V 樣總:提取液總體積,10 mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g; T:反應(yīng)時(shí)間,5min。

 

淀粉系列   單價(jià)
QS3400 淀粉含量測試盒可見分光光度法50管/48樣260
MS3400 淀粉含量測試盒微量法100管/96樣500
QS3401α-淀粉酶測試盒可見分光光度法50管/24樣250
MS3401α-淀粉酶測試盒微量法100管/48樣480
QS3402β-淀粉酶測試盒可見分光光度法50管/24樣460
MS3402β-淀粉酶測試盒微量法100管/48樣900
QS3403-50ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法50管/48樣2300
QS3403-25ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法25管/24樣1600
MS3403ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒微量法100管/96樣4400
QS3404-50可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
QS3404-25可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
MS3404可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒微量法100管/96樣6000
QS3405-50結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒紫外分光光度法50管/48樣3200
QS3405-25結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒紫外分光光度法25管/24樣2000
MS3405結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒微量法100管/96樣6000
QS3406淀粉分支酶(SBE)測試盒可見分光光度法50管/24樣850
MS3406淀粉分支酶(SBE)測試盒微量法100管/48樣1600

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