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BCA 法蛋白含量測(cè)定試劑盒 說(shuō)明 技術(shù)文章

更新時(shí)間:2019-06-11  |  點(diǎn)擊率:3645
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BCA 法蛋白含量測(cè)定試劑盒

商品貨號(hào):QS3202
英文名稱:BCA Protein Assay Kit
別名:BCA法蛋白含量測(cè)定試劑盒
檢測(cè)方法:常量法

 

商品貨號(hào):商品品牌:規(guī)格基本售價(jià)選擇規(guī)格
QS3202-50管/48樣索橋生物50管/48樣¥100.00元 

 

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

 

測(cè)定意義:

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。

測(cè)定原理:

堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+;2分子的BCA與Cu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰大。

 

產(chǎn)品說(shuō)明書

貨號(hào): QS3202           規(guī)格:50 管/48 樣

 

   BCA 法蛋白含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書 可見分光光度法

 

注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定,

測(cè)定意義:

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量 分析。

測(cè)定原理:

堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將 Cu2+還原成 Cu+; 2 分子的 BCA 與 Cu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在 540-595nm 有吸收峰,562nm 處吸收峰大。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)、移液器、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑 A:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。

試劑 B:液體 1mL×1 支,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)蛋白:液體 2 mL×1 支,4℃保存。

工作液配制:臨用前請(qǐng)根據(jù)擬用工作液體積(樣本數(shù)×1 mL),將試劑 A 和 B 按照 50:1 的比例混合,蓋緊后充分混勻。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)提取:

1. 液體樣品:澄清無(wú)色液體樣品可以直接測(cè)定。

2. 組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織, 加入 1mL 提取液(自備),根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水) 冰浴勻漿,8000g,4℃離心 10min,取上清,即待測(cè)液。

3. 細(xì)菌、細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min);然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測(cè)。

測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 562 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 工作液置于 60℃水浴預(yù)熱 30 min。 

 

 空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管
蒸餾水(μ L)20  
標(biāo)準(zhǔn)品(μ L) 20 
待測(cè)液(μ L)  20
工作液(μ L)100010001000
混勻后置于 60℃保溫 30min,于 1mL 比色皿在 562nm 處測(cè)定吸光值 A,分別記為 A 空白管、A 標(biāo)準(zhǔn)管、A 測(cè)定。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要做一次。

計(jì)算公式:

Cpr (mg/mL) = C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管) = 0.5×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)

Cpr (mg/g)= C 標(biāo)準(zhǔn)品×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷ W = 0.5×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷ W

W: 樣本質(zhì)量,g

注意事項(xiàng):

BCA 法蛋白含量測(cè)定試劑盒,適用于測(cè)定蛋白濃度在 20-5000μ g/ml 樣品。測(cè)定前取 1-2 個(gè)樣 做預(yù)實(shí)驗(yàn),若 A 測(cè)定管-A 空白管﹥1.5,需將樣本用提取液稀釋后再測(cè)定,以確保測(cè)定的準(zhǔn) 確性。

 

蛋白含量測(cè)定系列   價(jià)格
QS3200-50雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒可見分光光度法50管/48樣60
MS3200雙縮脲法蛋白含量測(cè)試盒微量法100管/96樣100
QS3201-50考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測(cè)試盒可見分光光度法50管/48樣60
MS3201考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測(cè)試盒微量法100管/96樣100
QS3202BCA蛋白法含量測(cè)試盒可見分光光度法50管/48樣100
MS3202BCA蛋白法含量測(cè)試盒微量法100管/96樣190

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