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谷胺酰胺合成酶(GS)試劑盒 說明書 技術(shù)文章

更新時間:2019-06-06  |  點擊率:2049
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谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)活性檢測試劑盒

商品貨號:MS1807
英文名稱:Micro Glutamine Synthetase(GS)Assay Kit
別名:谷氨酰胺合成酶試劑盒 GS Kit 谷氨酰胺合成酶(GS)試劑盒 谷氨酰胺合成酶(GS)測試盒
檢測方法:微量法

 

商品貨號:商品品牌:規(guī)格基本售價選擇規(guī)格
MS1807-100管/48樣索橋生物100管/48樣¥550.00元 

 

  • 產(chǎn)品詳細(xì)介紹

 

測定意義:

GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。

測定原理:

GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成的絡(luò)合物在540nm處有大吸收峰,可用分光光度計測定。

 

 

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  • 產(chǎn)品說明書

 

貨號: QS1807                                             規(guī)格:50管/24樣

谷胺酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)試劑盒說明書 可見分光光度法

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷 氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲 存和運輸形式。

測定原理:

GS 在 ATP 和 Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為 γ ─ 谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在 540nm 處有大吸收峰, 可用分光光度計測定。

自備實驗用品及儀器:

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和 蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:30mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:10mL×1 瓶,-20℃保存。

試劑二:10mL×1 瓶,-20℃保存。

試劑三:粉劑×2 瓶,-20℃保存。用時每瓶加入 5mL 蒸餾水充分溶解備用,用不完的試 劑仍-20℃保                                                   存。

試劑四:10mL×1 瓶,4℃避光保存。

樣本測定的準(zhǔn)備:

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超 聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃ 離心 10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織, 加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟:

1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、在 EP 管中加入下列試劑:

試劑名稱(μ L)   測定管         對照管

試劑一         320

試劑二                       320

試劑三         140            140

樣本          140            140

       混勻,37℃(哺乳動物)或 25℃(其他物種)準(zhǔn)確水浴 30min

試劑四         200            200

混勻,靜置 10min 后,5000g,25℃離心 10min,取上清液測定 540nm 處的吸光值 A。△A=A 測 定管-A 對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。 

GS 活力單位的計算:

1、血清(漿)GS 活性 單位定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應(yīng)體系中每 min 使 540 下吸光值變化 0.01 定義為一個 酶活力單位。

計算公式:

GS(U/mL)=Δ A×V 反總÷V 樣÷0.01÷T =19×Δ A

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞 GS 活性

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應(yīng)體系中每 min 使 540nm 下吸光值變化 0.01 定義為一 個酶活力單位。

GS(U/mg prot)=Δ A×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷0.01÷T =19×Δ A÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每 g 組織在每 mL 反應(yīng)體系中每 min 使 540nm 下吸光值變化 0.01 定義為一個酶 活力單位。

GS(U/g 鮮重)=Δ A×V 反總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =19×Δ A÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算 單位定義:每 1 萬個細(xì)菌或細(xì)胞在每 mL 反應(yīng)體系中每 min 使 540nm 下吸光值變化 0.01 定義 為一個酶活力單位。

GS(U/10^4 cell)=Δ A×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =0.038×Δ A

V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.8mL; V 樣:加入樣本體積,0.14mL;V 樣總:加入提取液體積, 1 mL;T:反應(yīng)時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或 細(xì)胞總數(shù),500 萬。

 

系列產(chǎn)品及單價

氮代謝系列    
QS1800硝酸還原酶(NR)測試盒可見分光光度法50管/24樣240
MS1800硝酸還原酶(NR)測試盒微量法100管/48樣450
QS1801谷氨酸合成酶(GOGAT)測試盒 紫外分光光度法50管/48樣500
MS1801谷氨酸合成酶(GOGAT)測試盒微量法100管/96樣950
QS1802谷氨酰胺酶(GLS)測試盒可見分光光度法50管/48樣580
MS1802谷氨酰胺酶(GLS)測試盒微量法100管/96樣1100
QS1803谷氨酸脫氫酶(GDH)測試盒紫外分光光度法50管/48樣580
MS1803谷氨酸脫氫酶(GDH)測試盒微量法100管/96樣1100
QS1805水土中亞硝酸鹽含量測試盒可見分光光度法50管/48樣140
MS1805水土中亞硝酸鹽含量測試盒微量法100管/48樣270
QS1806食品中亞硝酸鹽含量測試盒可見分光光度法50管/48樣200
MS1806食品中亞硝酸鹽含量測試盒微量法100管/96樣380
QS1807谷氨酰胺合成酶(GS)測試盒可見分光光度法50管/24樣280
MS1807谷氨酰胺合成酶(GS)測試盒微量法100管/48樣550
QS1808植物硝態(tài)氮測試盒可見分光光度法50管/48樣360
MS1808植物硝態(tài)氮測試盒微量法100管/96樣700
QS1811植物氨態(tài)氮測試盒可見分光光度法50管/48樣500
MS1811植物氨態(tài)氮測試盒微量法100管/96樣960
QS1812尿素氮測試盒可見分光光度法50管/48樣70
MS1812尿素氮測試盒微量法100管/96樣100
QS1813亞硝酸還原酶(NiR)測試盒可見分光光度法50管/24樣650
MS1813亞硝酸還原酶(NiR)測試盒微量法100管/48樣1250
QS1814脲酶(UE)測試盒可見分光光度法50管/24樣380
MS1814脲酶(UE)測試盒微量法100管/48樣750

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