透析袋原理介紹及使用方法步驟

自1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室簡便常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中，除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi)。

下面分別介紹透析袋和透析膜使用方法和步驟

透析袋使用前處理方法：

1. 把透析袋剪成適當(dāng)長度（10-20cm）的小段。
2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 10mmol/L EDTA(pH8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。
3. 用蒸餾水*清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。
5.冷卻后，存放于4度，必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時(shí)起取用透析袋是必須戴手套。 
6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出，將之清洗干凈。

透析膜使用前處理方法：

1. 戴手套把透析膜剪成適當(dāng)長度，浸在蒸餾水中 15 min 泡軟。
2. 浸入 10 mM sodium bicarbonate 中，并加熱至 80℃，一邊攪拌至少 30min。
3. 換到 10 mM Na2ull;EDTA 中浸泡 30 min，以新鮮的 EDTA 同樣方法處理三次。
4. 再用 80℃ 蒸餾水洗 30 min，然后換到 20% 酒精中，放在 4℃冰箱中保存。

透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4℃透析，升高溫度可加快透析速度。通常在試驗(yàn)前需要確定透析袋的截留分子量。